溫度升高的趨勢是保留時(shí)間提前，一般柱溫增加1℃，保留值通常減小1~2%。保留值改變也可引起分離度變化，理論上說，溫度提高有利于提高柱效，增加分離度，但由于不同物質(zhì)對溫度的敏感程度不同，這也不是絕對的。用溫度優(yōu)化液相色譜分析方法的優(yōu)點(diǎn)是使用方便，不需要更換色譜柱和流動(dòng)相，是改變峰間距和改善分離的有效參數(shù)。

同時(shí)升高柱溫，會(huì)改變流動(dòng)相的粘度(一般表現(xiàn)為柱壓降低)和分析物的溶解性，進(jìn)而影響某些物質(zhì)的保留特性和選擇性；而溫度的不平衡會(huì)導(dǎo)致峰扭曲變形。因此柱溫在液相色譜分離過程中扮演了一個(gè)重要的角色，如果想得到穩(wěn)定可靠的分離結(jié)果，色譜柱的溫度變化是不可忽視的。對于液相色譜來說，柱溫升高可加快分離過程，但因樣品保留時(shí)間不穩(wěn)將增加檢測工作的麻煩，分辨率也可能下降；相反，當(dāng)柱溫低時(shí)，分辨率提高，但分離過程時(shí)間會(huì)加長，因?yàn)樵跍囟鹊偷那闆r下，流動(dòng)相黏度增加會(huì)延長檢測時(shí)間，增加泵的磨損，同時(shí)，溶解度相對下降會(huì)出現(xiàn)緩沖鹽結(jié)晶而堵塞泵、進(jìn)樣閥、管道、色譜柱的現(xiàn)象，雜質(zhì)吸附在填料上而難于洗脫，從而影響色譜柱的使用壽命。