液相色譜柱是指利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進行先分離,而后分析鑒定的儀器。
液相色譜柱對高沸點、難氣化合物的混合物通過色譜柱核淋洗劑并以實現(xiàn)分離。應用于生物醫(yī)學、環(huán)境化學、石油化工等部門。在選擇液相色譜柱之前,先多了解自己的樣品和雜質(zhì),他們的類型結(jié)構(gòu)、極性、酸堿性、分子量大小等等。
液相色譜儀根據(jù)固定相是液體或是固體,又分為液-液色譜(LLC)及液-固色譜(LSC)?,F(xiàn)代液相色譜儀由高壓輸液泵、進樣系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)、色譜柱、檢測器、信號記錄系統(tǒng)等部分組成。與經(jīng)典液相柱色譜裝置比較,具有、快速、靈敏等特點。
1、樣品是極性的且弱酸性的;
就可以選擇C18在100%酸性水溶液條件下檢測,即要選擇承受100%純水且對極性化合物保留很好的色譜柱
2、若樣品是堿性的;
可選擇高純硅膠柱(高純硅膠缺少金屬雜質(zhì),且硅膠端基封尾)或一些經(jīng)過修飾的C18柱(如極性嵌入技術(shù)或堿去活技術(shù)等),他們都會減少堿性化合物的拖尾,一般會選擇中性或偏堿的條件下做,因為這樣可增加堿性樣品的保留。
3、如果樣品極性太強,或酸性太強;
可以選擇成都摩爾提供的C18色譜柱,液相色譜柱(親水色譜),也有使用C18+強陰離子對試劑或強陰離子交換色譜柱(缺點是離子對試劑平衡時間長,對流動相pH要求比較精密,否則很難重復實驗,另外離子對試劑很難洗下來,基本上用了離子對的色譜柱就不能再用于其它實驗
4、如果堿性化合物的極性太強,或堿性太強;
液相色譜柱可以選擇寬pH的C18液相色譜柱在高pH值檢測(優(yōu)點是方法開發(fā)簡單,缺點是目前實現(xiàn)這一技術(shù)的色譜柱品牌比較少,或者選用液相色譜柱,選擇強離子交換柱也有使用C18+強陰離子對試劑或強陰離子交換色譜柱。