技術(shù)文章
常用的c18液相色譜柱,當(dāng)拿到新的C18柱時應(yīng)該怎樣進(jìn)行活化及維護(hù)?為什么要這樣做?
新柱活化,實際上是一個平衡的過程,除了用流動相平衡外,有時候還必須用所測樣品對新柱進(jìn)行平衡。特別是測定分子量比較高的多肽,尤其重要。因為分子量高的物質(zhì)分子,擴(kuò)散速度慢,平衡所需時間也相應(yīng)較長。
具體平衡方式也很簡單,多進(jìn)幾次測試樣品,直到峰面積和保留時間穩(wěn)定,再進(jìn)行正式進(jìn)樣測定。
如果要加快平衡時間,把前面用來平衡的進(jìn)樣樣品濃度加大,或者不等洗脫完成,連續(xù)進(jìn)樣多針。用待測物對新柱平衡,目的是將硅膠基質(zhì)填料表面具有非特異性吸附的位點的吸附能力飽和掉。